1. 产品介绍

在胚胎发育的过程中，干细胞可以分化形成所有的胚胎组织。miRNA是一段小的非编码RNA分子（大约20个核苷酸长），对基因的表达调控和细胞分化起着重要的作用。近来研究发现干细胞的正常维持和分化是受到miRNA严格调控的。在干细胞中，miRNA的表达水平也不一样。因此，对干细胞miRNA表达的研究可以帮助了解干细胞的调控机制。例如,在神经线性分化（neural lineage differentiation）的过程中，脑组织特异性的miR-124a和miR-9的表达也差别很大。干细胞miRNA芯片是专门检测对干细胞维持和分化起重要作用的69种miRNA表达水平的，可以用于人源，小鼠，以及大鼠的样品中。

美国Signosis公司的T7-OLA(oligo Ligation Assay)专利技术在microRNA表达分析领域具有国际领先地位，和市场上其他类似产品相比，Signosis的miRNA芯片具有以下优点：

• 高识别力-可以区分所有的let7 miRNA isoforms,即便是只有一个核苷酸的差别，也能被检测出来
• 高灵敏度-可以检测出的微量microRNA
• 线性扩增-芯片所捕捉的miRNAs会被T7启动子扩增，而不必像其他产品那样，是通过PCR来扩增，PCR的缺点是可能引入一些干扰因素，从而使得结果分析会出现偏差
• 无需事先纯化miRNA,总RNA可以直接进行分析
• 实验过程简单，无需购买定量PCR仪,以及荧光检测仪等昂贵仪器
  

2. T7-OLA(T7-oligo ligation assay)专利技术图解
对每一个miRNA分子，都有两对引物来识别该分子,每个引物只识别一半的序列。其中的一个引物中含有标示序列（Tag），另外一个引物含有T7启动子序列。只有序列完全匹配的时候，两个引物才能和miRNA杂交，形成RNA/DNA的杂合体。然后，含有生物素（biotin，B）的短序列通过互补结合到其中的一个引物上。通过结合有亲和素(Streptavidin)的磁珠进行分离出杂合体。然后，两个引物在T4连接酶的作用下，被连接成一个DNA片断。即使只有一个核苷酸不匹配都会造成杂交或者连接失败。这也是为什么OLA产品具有高识别力的原因。为了增加分子的稳定性，该DNA/RNA杂合体被延伸了一段序列。随后，经过一个线性扩增（转录）阶段，把含有生物素的UTP整合到该核苷酸序列中。把转录好的核苷酸序列和预先准备好的含有不同miRNA序列的膜，进行杂交。最后经过和连接有辣根过氧化物酶（HRP)的亲和素反应来显色。