1. 产品介绍
microRNA（miRNA,微RNA ）是存在于植物和动物体内，高度保守，长度大约在21个核苷酸的非蛋白编码小RNA。其主要生物学作用是通过结合mRNA的3’非编码区（3-UTR）来调控哺乳动物细胞中30%的基因表达。miRNA所参与的生物及疾病过程包括：胚胎发育，细胞分化，癌症，病毒感染等。在人基因组中，已经确定有多达400多种miRNA，其中许多miRNA只相差一个或者几个核苷酸。

美国Signosis公司的T7-OLA(oligo Ligation Assay)专利技术在microRNA表达分析领域具有国际领先地位，和市场上其他类似产品相比，Signosis的miRNA芯片具有以下优点：

• 高识别力-可以区分所有的let7 miRNA isoforms,即便是只有一个核苷酸的差别，也能被检测出来
• 高灵敏度-可以检测出的微量microRNA
• 线性扩增-芯片所捕捉的miRNAs会被T7启动子扩增，而不必像其他产品那样，是通过PCR来扩增，PCR的缺点是可能引入一些干扰因素，从而使得结果分析会出现偏差
• 无需事先纯化miRNA,总RNA可以直接进行分析
• 实验过程简单，无需购买定量PCR仪,以及荧光检测仪等昂贵仪器
  

芯片I所检测出的miRNA:

2. T7-OLA(T7-oligo ligation assay)专利技术图解
对每一个miRNA分子，都有两对引物来识别该分子,每个引物只识别一半的序列。其中的一个引物中含有标示序列（Tag），另外一个引物含有T7启动子序列。只有序列完全匹配的时候，两个引物才能和miRNA杂交，形成RNA/DNA的杂合体。然后，含有生物素（biotin，B）的短序列通过互补结合到其中的一个引物上。通过结合有亲和素(Streptavidin)的磁珠进行分离出杂合体。然后，两个引物在T4连接酶的作用下，被连接成一个DNA片断。即使只有一个核苷酸不匹配都会造成杂交或者连接失败。这也是为什么OLA产品具有高识别力的原因。为了增加分子的稳定性，该DNA/RNA杂合体被延伸了一段序列。随后，经过一个线性扩增（转录）阶段，把含有生物素的UTP整合到该核苷酸序列中。把转录好的核苷酸序列和预先准备好的含有不同miRNA序列的膜，进行杂交。最后经过和连接有辣根过氧化物酶（HRP)的亲和素反应来显色。